UV紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的原理基于物質(zhì)對(duì)紫外可見(jiàn)光的吸收特性。具體來(lái)說(shuō),當(dāng)紫外可見(jiàn)光通過(guò)樣品溶液時(shí),溶液中的分子會(huì)吸收特定波長(zhǎng)的光,產(chǎn)生吸收光譜。每種物質(zhì)由于其分子結(jié)構(gòu)的不同,對(duì)光的吸收情況也會(huì)不同,因此每種物質(zhì)可吸收光譜。
利用這一原理,通過(guò)測(cè)量樣品溶液對(duì)不同波長(zhǎng)光的吸收程度,從而分析出樣品的成分、濃度等物理或化學(xué)性質(zhì)。它主要由光源、單色器、樣品室、檢測(cè)器和信號(hào)處理器等部件組成。光源提供足夠強(qiáng)度的、穩(wěn)定的連續(xù)光譜;單色器將光源發(fā)出的復(fù)合光分解成所需波長(zhǎng)的單色光;樣品室中放置待測(cè)樣品,樣品吸收部分特定波長(zhǎng)的光;檢測(cè)器檢測(cè)透過(guò)樣品的光的強(qiáng)度,并將其轉(zhuǎn)換成電信號(hào);信號(hào)處理器對(duì)電信號(hào)進(jìn)行處理和計(jì)算,得到所需的吸光度值或其他相關(guān)參數(shù)。
在UV紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)中,比爾-朗伯定律是一個(gè)重要的定量關(guān)系式。它描述了吸光度(A)與溶液濃度(c)和光程(b,即溶液層厚度)之間的關(guān)系:A = εbc,其中ε為摩爾吸光系數(shù),是物質(zhì)常數(shù)。通過(guò)測(cè)量不同濃度下樣品的吸光度,并結(jié)合比爾-朗伯定律,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)樣品濃度的定量分析。
在選擇UV紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)時(shí),需要考慮以下因素:
1.明確您需要使用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)進(jìn)行哪些類型的分析,例如:定量分析、定性分析、光譜掃描等。
2.了解您需要分析的樣品類型、濃度范圍以及是否涉及特殊樣品(如生物樣品、有機(jī)溶劑等)。
3.確保儀器能夠覆蓋您所需分析的波長(zhǎng)范圍,通常紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的波長(zhǎng)范圍在190-1100 nm之間。
4.選擇具有高精度和高重復(fù)性的儀器,以確保測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。
5.這些指標(biāo)直接影響測(cè)量結(jié)果的可靠性。
6.分辨率越高,能夠檢測(cè)到的光譜細(xì)節(jié)越多。
7.考慮光源的穩(wěn)定性和檢測(cè)器的靈敏度。