uv紫外可見分光光度計經不斷改進,又出現(xiàn)自動記錄、自動打印、數(shù)字顯示、微機控制等各種類型的儀器,使光度法的靈敏度和準確度也不斷提高,其應用范圍也不斷擴大。紫外可見分光光度法從問世以來,在應用方面有了很大的發(fā)展,尤其是在相關學科發(fā)展的基礎上,促使分光光度計儀器的不斷創(chuàng)新,功能更加齊全,使得光度法的應用更拓寬了范圍。目前,分光光度法已為工農業(yè)各個部門和科學研究的各個領域所廣泛采用,成為人們從事生產和科研的有力測試手段。
uv紫外可見分光光度計結構
一般地,紫外可見分光光度計主要由光源系統(tǒng)、單色器系統(tǒng)、樣品室、檢測系統(tǒng)組成(圖1) 。光源發(fā)出的復合光通過單色器被分解成單色光,當單色光通過樣品室時,一部分被樣品吸收,其余未被吸收的光到達檢測器,被轉變?yōu)殡娦盘?,經電子電路的放大和?shù)據處理后。通過顯示系統(tǒng)給出測量結果。
紫外可見分光光度計結構
光源:發(fā)出所需波長范圍內的連續(xù)光譜,有足夠的光強度,穩(wěn)定??梢姽鈪^(qū):鎢燈,碘鎢腳~2 硒) ;
紫外區(qū):氫燈,鍬q(180~375, Ⅱn) 氙燈:紫外、可見光區(qū)均可用作光源。 單色器:將光源發(fā)出的連續(xù)光譜分解為單色光的裝置。
棱鏡:依據不同波長光通過棱鏡時折射率不同。
光柵:在鍍鋁的玻璃表面刻有數(shù)量很大的等寬度等間距條痕(600、1200、2400條/mm) 。利用光通過光柵時發(fā)生衍射和干涉現(xiàn)象而分光。
吸收池:用于盛待測及參比溶液。可見光區(qū):光學玻璃池;紫外區(qū):石英池。檢測器利用光電效應,將光能轉換成電流訊號。光電池,光電管,光電倍增管。 檢流計(指示器) :刻度顯示或數(shù)字顯示、自動掃描記錄。
uv紫外可見分光光度計原理
物質的吸收光譜本質上就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎㈣。分光光度分析就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質問相互作用的有效手段。紫外可見分光光度法的定量分析基礎是朗伯一比爾(Lambert—Beel-) 定律。即物質在一定濃度的吸光度與它的吸收介質的厚度呈正比,其數(shù)學表示式如下:
uv紫外可見分光光度計由光源鎢燈和氘燈發(fā)出的復合光經由步進電機控制帶動反光鏡M 1,反射通過入射狹縫,并進人單色器中,光柵衍射出的單色光經準直鏡M2調焦,會聚通過出射狹縫,光束到達斬光器時,一段時間內的光射成為參比光路,另一段時間內的光透射成為樣品光路。zui后兩光交替地照射在檢測器(光電倍增管)。
光電倍增管檢測出的信號經由前置放大器,驅動卡傳遞給微機控制器,由微機控制器推動驅動卡居中協(xié)調各部分。
特點
分光光度法對于分析人員來說,可以說是zui常用和有效的工具之一。幾乎每一個分析實驗室都離不開紫外可見分光光度計。分光光度法具有以下主要特點。
1、靈敏度高
由于新的顯色劑的大量合成,并在應用研究方面取得了可喜的進展,使得對元素測定的靈敏度有所推進,特別是有關多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到數(shù)十萬。
2、選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
3、準確度高
對于一般的分光光度法,其濃度測量的相對誤差在l ~3%范圍內,如采用示差分光光度法進行測量,則誤差可減少到0.X %。
4、適用濃度范圍廣
uv紫外可見分光光度計可從常量(1%一50%)GE 其使用示差法) 到痕量(10.8—10.6%)(經預富集后) 。
5、分析成本低、操作簡便、快速、應用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素滁少數(shù)放射性元素和惰性元素之外) 均可采用此法。在上發(fā)表的有關分析的論文總數(shù)中,光度法約占28%,我國約占所發(fā)表論文總數(shù)的33%。